1987年，9岁的王珮瑜以一曲《木兰辞》获得苏州评弹艺术节一等奖，代表江、浙、闽三省赴北京参加故事大赛。 1989年，11岁的王珮瑜被喜爱京剧的舅舅领进京剧大门，她刚开始学的行当是老旦，后来她改学老生。 1991年，作为业余京剧爱好者的王珮瑜以《钓金龟》获得江苏省“五一杯”老旦奖。 1992年，王珮瑜考入上海市戏曲学校专攻老生行当。在校期间，王珮瑜师承王思及老师，并先后得到朱秉谦、关松安、孙岳、李甫春、王世续、曲永春、童强、张学津、谭元寿等老师的教诲。王珮瑜在学校时属于特别培养生，期间担任了班长、学生会主席，并参加了多次演出。 1994年，王珮瑜参加“宝钢杯”全国优秀少年京剧邀请赛，获得专业组一等奖；同年获得“新苗杯”全国少儿京剧大赛一等奖。 1996年，王珮瑜参加“梨园杯”全国戏曲中专基本功大赛，获得华东区一等奖；同年获得“蓝岛杯”海峡两岸五戏校京剧邀请赛一等奖。 1999年9月，王珮瑜考入上海师范大学表演艺术学院。 2001年7月，王珮瑜从上海师范大学表演艺术学院毕业后进入上海京剧院工作。同年，王珮瑜获得获得CCTV全国青年京剧演员电视大赛最佳表演奖（老生组），以及全国京剧优秀青年演员评比展演一等奖。 获得第十三届上海白玉兰戏剧表演艺术“主角奖”。 2008年，在电影《梅兰芳》中，王珮瑜为章子怡扮演的孟小冬配唱《游龙戏凤》选段。 2010年6月16日，在纪念梅兰芳京剧团重建15周年举办的梅派经典剧目系列演出中，王珮瑜受邀和梅葆玖等共同主演《四郎探母》。 2011年获得第二十五届中国戏剧奖·梅花表演奖。 2013年4月19日，“纪念张伯驹先生诞辰115周年京剧演唱会”在北京梅兰芳大剧院举行，王珮瑜受邀登台献艺。5月18日，王珮瑜主讲的莲池读书会第十四讲《古调今谈—浅谈京剧老生的演唱与表演》在河北大学新校区举行。 2017年2月2日，王珮瑜参加中央电视台戏曲频道《角儿来了》节目并表演。 2017年4月22日、4月23日，《文图会》作为“第十届东方名家名剧月”的参演剧目于4月22日至23日亮相东方艺术中心。 2018年9月24日，王珮瑜受邀参加2018年中央广播电视总台中秋晚会，演唱歌曲 《但愿人长久》。 2019年2月4日，王珮瑜参加2019年中央广播电视总台春节联欢晚会，参与表演戏曲《锦绣梨园》。